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主要脱毒方法
1、取材料,对脱毒品种的块茎进行消毒。当芽长4-5厘米时,将芽切去外叶,用自来水冲洗40分钟,无菌室用漂白液消毒,再用无菌水冲洗2-3次。
2、无菌室去皮接种。在40倍解剖显微镜下,将茎尖从原基部剥离一片叶子,接种于MS茎尖培养基的试管中。试管MS茎尖培养基由大量元素、微量元素、有机成分、生长素、细胞分裂素、蔗糖和琼脂组成。pH值为5.7,高压灭菌后使用。在每个试管中接种一个茎尖。
3、培养条件接种后的茎尖在25℃、1500~3000lx光照条件下培养,3个月后生长成3~4叶小苗。在无菌条件下,在一些幼苗中检测到病毒。
4病毒检测是茎尖脱毒不可缺少的步骤。它常用于鉴定寄主,即用指示植物或血清学方法进行检测,及时清除指示植物上有血清学阳性反应或症状的茎尖苗。无任何反应的茎尖苗,即脱毒苗,用于繁殖。
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